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规模化培养文献资料
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微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究
目的 探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定佳增殖条件.方法 将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓度TPCK-胰酶、在不同pH值的培养液中培养,接毒后不同时间的病毒血凝素滴度(HA).根据佳增殖条件将病毒接种至生长在微载体上的MDCK细胞中,利用250mL和5L转瓶逐级进行大规模增殖.结果 佳病毒增殖条件为TPCK-胰酶终浓度为10 μg/mL,接毒剂量为MOI=0.025,培养液pH值为7.4,在此条件下,H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)适应在250mL和5L转瓶中微载体培养的MDCK 细胞内大量增殖,病毒的高血凝价均可达到9log_2(1:512).结论 本研究为以哺乳动物细胞为基质规模化生产禽流感疫苗奠定了基础.
关键词： 微载体 H9N2亚型禽流感病毒 MDCK细胞 规模化培养 -
Vero 细胞无血清培养基的研究进展
Vero 细胞是世界卫生组织和《中国药典》认可的用于人用疫苗和动物疫苗生产的细胞系，Vero 细胞无血清培养生产疫苗已成为当前的主要趋势。无血清培养的关键是设计符合 Vero 细胞贴壁特性和提高细胞密度的无血清培养基，这也是规模化培养的关键因素之一。Vero 细胞无血清培养基的开发与使用一方面减少了对动物血清的依赖，提高了病毒性疫苗的质量安全；另一方面促进了无血清培养技术的发展与应用。现就 Vero 细胞无血清培养基的研究进展予以综述。
