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子孢子苏氨酸及天冬酰胺富集蛋白文献资料
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恶性疟原虫海南株STARP基因真核表达重组质粒的构建及基因结构分析
目的构建恶性疟原虫海南(FCC1/HN)株STARP基因真核表达重组质粒pcDNA3-STARP；分析STARP基因结构,并了解FCC1/HN株与其它分离株STARP基因序列的差异。方法根据STARP基因已知序列设计合成两对引物,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增两个部分序列重叠的STARP基因片段；将两基因片段分别双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。酶切，PCR扩增鉴定筛选重组质粒阳性克隆；用双脱氧链末端终止法测序，应用软件辅助分析基因结构及进行同源性比较。结果分别PCR扩增获得1 078bp，1 092bp的两个STARP基因片段；经双酶切及PCR鉴定表明获得正确重组质粒；恶性疟原虫FCC1/HN株与T9/96株STARP基因核苷酸序列同源性为92.2%；推测编码氨基酸序列同源性为90.9%；在STARP蛋白中部重复区推测有多个明显的抗原表位区段。结论从FCC1/HN株恶性疟原虫基因组DNA中获取STARP基因，并成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-STARP；FCC1/HN株与其它分离株STARP基因有高度的同源性。
关键词： 恶性疟原虫 子孢子苏氨酸及天冬酰胺富集蛋白 聚合酶链式反应 克隆 基因测序
