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乙脑病毒NS5蛋白文献资料
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流行性乙型脑炎病毒NS5蛋白的表达
目的在大肠杆菌中表达并纯化流行性乙型脑炎病毒NS5蛋白,为进一步研究乙脑病毒NS5蛋白的结构与功能奠定基础.方法根据乙脑病毒NS5蛋白的基因序列,设计两对PCR引物,采用RT-PCR法分别扩增乙脑病毒JaOH0566株部分及全长NS5基因.将扩增产物分别克隆到表达载体pQE30.筛选重组质粒,转化大肠杆菌表达重组蛋白.重组蛋白经金属柱亲和层析纯化.结果与结论获得了含部分及全长乙脑病毒NS5基因的重组质粒,重组质粒经限制性酶双酶切、DNA序列分析及PCR扩增筛选证实.在大肠杆菌中表达出了带6个组氨酸头的部分及全长的重组乙脑病毒NS5蛋白.经SDS-PAGE及Western-blot分析证实表达蛋白确实是重组乙脑病毒NS5蛋白.
