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TGF-β上调lncRNA-ATB促进骨肉瘤细胞MG-63细胞转移的实验研究
目的:探讨lncRNA-ATB在TGF-β促进骨肉瘤细胞转移中的作用和机制.方法:用脂质体法将pro-ATB和shRNA-ATB的质粒转染到人骨肉瘤细胞MG-63细胞,用嘌呤霉素筛选稳定细胞株;用脂质体法将过表达mimics-30a或inhibitor-30a转染到MG-63细胞;Q-PCR法检测lncRNA-ATB和miR-30家族表达;Transwell法检测细胞转移能力;western blot检测ZEB1和E-cadherin蛋白表达.结果:TGF-β促进lncRNA-ATB和ZEB1蛋白表达,抑制miR-30a家族和E-cadherin蛋白表达,增加MG-63细胞转移能力;而敲低lncRNA-ATB表达后TGF-β的作用明显减弱.过表达lncRNA-ATB的MG-63细胞转移能力明显增强,ZEB1蛋白表达增加,miR-30a和E-cadherin蛋白表达下降;而mimics-30a可以抑制lncRNA-ATB的作用.相反,敲低lncRNA-ATB后,MG-63细胞转移能力和ZEB1蛋白表达明显减弱,miR-30a和E-cadherin蛋白表达增加,而inhibitor-30a可以逆转敲低lncRNA-ATB对MG-63细胞的影响.结论:TGF-β通过上调lncRNA-ATB抑制miR-30a表达,进而增加ZEB1表达及下调E-cadherin蛋白,从而促进骨肉瘤细胞转移.
关键词: 骨肉瘤细胞转移 LncRNA-ATB miR-30a TGF-β