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剥夺钙和血清对培养的骨髓基质细胞的影响
目的 探讨剥夺钙和血清对培养的骨髓基质细胞(BMSCs)的影响.方法 将传至第2代的BMSCs用DMEM培养液和无钙DMEM培养液按不同比例配制成细胞悬液,细胞浓度为2×104 mL-1,再根据是否加10%FBS分为6组:无10%FBS正常钙组(1组)、10%FBS正常钙组(2组,正常对照组)、10%FBS1/3正常钙组(3组)、10%FBS1/6正常钙组(4组)、10%FBS无钙组(5组)和无10%FBS无钙组(6组).培养后4 h,1~7 d用CCK-8试剂盒检测BMSCs细胞增殖数.无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组、10%FBS无钙组和10%FBS正常钙组在培养后0、4、12、24和48 h,0、1、3、5和7 d 时在倒置相差显微镜下观察贴壁生长BMSCs细胞形态的变化.结果 1组、6组培养后4 h,1~7 d 时细胞增殖数均明显低于2组(均P＜0.01),3组培养后4 h,3~5 d时细胞增殖数明显低于2组(P＜0.05或P＜0.01);4组培养后4 h,1、3和5 d时细胞增殖数均显著低于2组(均P＜0.01),培养后7 d时细胞增殖数显著高于2组(P＜0.01);5组培养后4 h,1~3、5 d时细胞增殖数均显著低于2组(均P＜0.01).10%FBS无钙组、10%FBS正常钙组细胞形态正常,继续贴壁生长、增殖,细胞密度增加;无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组细胞培养后4 h时开始贴壁细胞变小,培养后1、3 d时大量细胞漂浮、死亡,仅有极少数细胞保持贴壁.结论剥夺钙和血清均对细胞生存不利,低钙浓度对于BMSCs有短期抑制生存作用,但BMSCs能适应低钙环境,恢复活力和增殖.BMSCs适应低钙的意义与机制有待进一步探讨.
