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miR-492、CD147在结肠癌细胞LS174T奥沙利铂耐药中的作用
目的:探讨miR-492、CD147在结肠癌细胞LS174T奥沙利铂(L-OHP)耐药中的作用.方法:采用浓度递增法建立获得性L-OHP耐药的人结肠癌细胞耐药模型LS174T/L-OHP;MTT法测定LS174T细胞及LS174T/L-OHP细胞对L-OHP的生长抑制率,分别采用RT-PCR和Western blot方法对LS174T细胞和LS174T/L-OHP细胞行miR-492与CD147的表达检测.结果:与LS 174T细胞相比较,LS174T/L-OHP细胞中miR-492表达减少、CD147表达增加.结论:miR-492可能通过调节CD147的表达在结肠癌细胞L-OHP耐药中发挥作用.
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miR-492在红细胞OK血型抗原表达调控中的作用
目的 探讨miR-492是否参与红细胞OK血型抗原表达的转录后调控.方法 化学合成2个BSG基因3'UTR片段,分别包含BSG rs 8259 TT或BSG rs 8259 AA位点.合成时两端加上XhoⅠ和NotⅠ酶切位点,克隆至pUC57载体,随后构建至psiCHECK-2载体,测序验证.分别将不同浓度的miR-492 mimic与构建的psiCHECK2-BSG-T或psiCHECK2-BSG-A重组质粒共转染K562细胞,设置空白对照,各转染实验重复3次.利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定海肾荧光素酶活性,并按萤火虫荧光素酶活性进行均一化处理,数据统计分析.结果 测序结果显示,成功构建了分别包含BSG rs 8259 TT或BSG rs 8259 AA位点的重组psiCHECK-2质粒.双荧光素酶报告基因检测结果表明,miR-492 mimic 浓度大于100nmol/L时,对psiCHECK2-BSG-T有显著抑制作用.而mir-492 mimic对psiCHECK-BSG-A无抑制作用.结论 miR-492可能参与了调控BSG rs 8259 TT基因型个体红细胞OK抗原的表达.
