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斑马鱼血清淀粉样蛋白A(SAA)的原核表达和功能鉴定
目的 人血清淀粉样蛋白A(SAA)是1种急相期反应蛋白,在人体内发生炎症反应时,体液中SAA的浓度显著增高.人SAA是1种模式识别蛋白,能与部分革兰氏阴性菌结合,促进巨噬细胞吞噬细菌的能力.以前研究证明在被细菌处理的斑马鱼体内SAA的表达量急速上升,表明斑马鱼SAA也是急相期反应蛋白,但在斑马鱼体内SAA具体作用并不清楚.方法 本实验中通过原核表达斑马鱼的SAA,体外研究SAA的功能.结果 实验证明原核表达的斑马鱼的SAA不但能够与革兰氏阴性菌如大肠杆菌和鳗弧菌以及革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌结合,还可以与LPS/LTA结合.促吞噬实验表明斑马鱼的SAA也能发挥调理素的作用促进鲤鱼的巨噬细胞对细菌的吞噬.结论 研究表明斑马鱼SAA与人的SAA一样,是1种模式识别蛋白,并具有调理素作用.
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初乳中补体介导的杀菌作用研究
目的 进一步探讨初乳中补体对血清敏感的大肠杆菌(E.coli 0111)的杀菌作用.方法 通过免疫浊度法检测正常人血清和产妇初乳中补体和免疫球蛋白的水平,通过血清稀释和灭活后细菌集落形成单位的变化来鉴定E.coli 0111对血清补体的敏感性,进而通过灭活、EDTA螯合等处理后检测初乳中补体对血清补体敏感型大肠杆菌E.coli 0111的杀菌作用,并应用ELISA方法检测初乳中补体在不同活化途径中沉积的调理素.结果 经鉴定E.coli 0111为血清补体敏感型大肠杆菌.初乳中C3、C4含量均值为0.143g/L、0.051g/L.全初乳和去脂乳均具有较强的杀菌作用,其抑制效果分别达到92%、82.3%.而经灭活或EDTA处理后,其杀菌功能极大丧失,降至5%左右(P＜0.001).经ELISA检测发现:初乳中补体在体外可以通过经典途径和旁路途径激活而产生调理素.结论 初乳中的补体成分具有很好的抑制大肠杆菌生长的作用.提示其在保护婴儿免受感染和疾病中具有重要的生理学意义.
