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骨形态蛋白4对高雄激素血症多囊卵巢综合征颗粒细胞增殖的影响
目的：探讨骨形态蛋白4对高雄激素血症多囊卵巢综合征颗粒细胞增殖的影响。方法收集100例在山东大学附属生殖医院行体外受精‐胚胎移植助孕治疗患者的卵泡液颗粒细胞体外培养，其中高雄激素PCOS 患者50例，对照组50例。两组细胞给予重组人Bmp4处理，分50ng／ml Bmp4组和100ng／ml Bmp4组，每组又根据作用时间的不同，分12、24、48h组。利用M TS法和EdU染色标记法，检测Bmp4对PCOS颗粒细胞增殖的影响。结果上调Bmp4能抑制高雄激素PCOS 患者颗粒细胞的存活率和增殖率，并与Bmp4的剂量呈正相关，Bmp4浓度越高，颗粒细胞的增殖率越低。结论 Bmp4能抑制高雄激素 PCOS 患者颗粒细胞的增殖，从而影响卵泡的发育。
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BMP4促进人骨膜来源细胞体外成软骨细胞分化
目的 探讨细胞因子BMP4在骨膜来源细胞体外培养中的定向成软骨分化作用. 方法 采用人胫骨骨膜为材料,体外组织块法分离骨膜来源细胞,置于DMEM/F12完全培养基培养,倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色细胞计数法检测第3、9代骨膜来源细胞和BMP4诱导后细胞的增殖活性,绘制细胞生长曲线图.随机分为对照组、软骨诱导组和实验组,分别加入完全培养基、软骨诱导液和BMP4加软骨诱导液,第14和21天分别采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色检测细胞的蛋白多糖和Ⅱ型胶原；定量PCR检测软骨基因Aggrecan、Ⅱ型胶原和SOX9 mRNA表达. 结果 (1)骨膜来源细胞在体外贴壁生长,经成软骨诱导l周后可见类圆形细胞形成,2周后细胞呈多角形,甲苯胺蓝染色呈阳性；细胞生长曲线证实诱导分化后细胞与第3代至第9代细胞增殖能力相似.(2)第14和21天软骨细胞标志物阳性率(％)实验组蛋白多糖(分别为40.29-4.29、56.74±5.12)和Ⅱ型胶原(分别为19.27±3.71、38.31±4.25)较软骨诱导组(第14和21天蛋白多糖分别为28.12±3.25、41.23±4.18,Ⅱ型胶原分别为10.24±1.21、15.28±2.23)明显升高(P＜0.05).(3)定量PCR:实验组Aggrecan (25.76±0.57)、Ⅱ型胶原(6.48±0.48)、SOX9(2.91±0.18) mRNA表达均明显高于软骨诱导组(11.12±0.38、2.24±0.41、1.54 ±0.35)和对照组(2.37±0.24、1.12±0.31、1.07±0.22) (P ＜0.05). 结论 骨膜来源细胞体外增殖能力强,经诱导可定向成软骨分化,BMP4在体外具有明显促进骨膜来源细胞分化为软骨细胞的作用.
