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  • 适用于中药醛糖还原酶抑制剂高通量筛选的细胞模型的建立

    作者:李璇;孙小玉;李小冬;朱荃

    目的:建立一种适合中药醛糖还原酶抑制剂高通量筛选的细胞模型,以避免中药对传统离体筛选方法的干扰.方法:以视网膜周细胞、肾小球系膜细胞为研究对象,确定佳孵育条件,并建立酶促微量反应法测定山梨醇含量,两者联动,建立细胞模型.结果:细胞孵育体系的佳反应条件为30 mmol·L-1葡萄糖孵育4 h;酶促微量反应测定山梨醇含量的精密度、重现性良好,山梨醇浓度变化与荧光强度变化呈线性正相关.山梨醇浓度在6.25×10-6~2.5×10-6mol·L-1范围内线性关系良好.结论:该细胞模犁能够排除中药对酶法测定醛糖还原酶活性的干扰,模拟体内的反应情况,使应用该模型进行的醛糖还原酶抑制剂筛选更具针对性,并适用于中药醛糖还原酶抑制剂的高通量筛选.

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