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二甲双胍抑制人前列腺癌细胞上皮间质转化及其作用机制
目的 研究二甲双胍对前列腺癌Vcap细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响,初步探讨microRNA(miRNA)相关的作用机制.方法 以PBS处理组作为对照,使用不同浓度二甲双胍(1～50 mmol/L)处理前列腺癌Vcap细胞,MTS比色法检测细胞的增殖能力;流式细胞术分析二甲双胍对Vcap细胞周期分布的影响;划痕和侵袭小室实验分别检测5mmol/L二甲双胍和miR30a对细胞迁移和侵袭能力的作用;使用RT-PCR和Westernblotting测定5mmol/L二甲双胍对Vcap细胞上皮指标物(E-cadherin、β-catenin)和间质指标物(Vimentin、Snail)mRNA和蛋白表达水平的影响;使用RT-PCR检测miR30a、miR143、miR185、miR196、miR205的表达水平变化.结果 二甲双胍抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性.5 mmol/L二甲双胍明显影响Vcap细胞的周期分布并显著抑制Vcap细胞的迁移和侵袭能力.二甲双胍在mRNA和蛋白水平上,显著上调Vcap细胞中E-cadherin和β-catenin的表达(P均＜0.05),下调Vimentin和N-cadherin的表达(P均＜0.05).进一步的实验发现,二甲双胍显著上调miR30a的表达水平(P＜0.05),而后者可显著抑制Vcap细胞的增殖和EMT的发生.结论 二甲双胍明显抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖、侵袭能力和上皮间质转化的过程.该过程可能涉及二甲双胍对miR30a的表达的上调.
