您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
101K被膜蛋白文献资料
-
人疱疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原决定簇区原核表达克隆的构建和表达
目的构建人疱疹病毒6型(HHV-6)101K被膜蛋白的原核高效表达克隆,并进行原核表达.方法PCR扩增HHV-6B 101K被膜蛋白的主要抗原决定簇区(666～834aa)编码基因片段(nt2 347～2 853),并导入T载体进行测序,与GenBank中HHV-6标准毒株序列比较以进一步鉴定.目的基因及表达载体pThioHis A分别经双酶切后连接,转化宿主菌E.coli BL21,应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒,并经测序证实.IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白.结果 PCR获得的目的基因序列与GenBank中HHV-6B标准毒株Z29序列一致,重组质粒诱导菌表达产物出现相对分子质量为31 900的融合蛋白条带.结论HHV-6 101K蛋白的原核表达克隆构建和表达成功,为进一步完善HHV-6活动性感染的血清学诊断提供了实验基础.
