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ZNF268基因干扰片段转染对卵巢癌细胞增殖、迁移的影响及其机制
目的 观察转染ZNF268基因干扰片段对卵巢癌细胞株SKOV-3增殖、迁移和周期的影响,并探讨其可能作用机制.方法 将SKOV-3细胞分为观察组和对照组,分别转染sh-ZNF268和空质粒,获得下调ZNF268的卵巢癌细胞系SKOV-3-sh-ZNF268和空白对照细胞系SKOV-3-sh-control.采用MTT法观察两组细胞增情况(结果以OD570表示);采用软琼脂克隆形成实验观察两组细胞克隆形成情况(结果以克隆形成率表示);采用划痕实验观察两组细胞迁移情况(结果以细胞迁移数量表示);采用碘化丙啶单染法和流式细胞术观察两组细胞周期分布;采用Western blotting法检测两组细胞cyclin D2、cyclin E2和CDK2蛋白.结果 转染1、2、3、4、5 d观察组细胞OD570均高于对照组(P均<0.05).对照组、观察组细胞克隆形成率分别为9.7 ±2.3%和19.2 ±1.5%,两组细胞克隆形成率相比,P<0.05.培养24h后两组细胞的划痕仍然明显存在;观察组、对照组划痕宽度分别为(2.53 ±0.12)、(1.28 ±0.11)μm,两组划痕宽度相比,P<0.05;观察组、对照组细胞迁移数量分别为(67.59 ±6.54)、(136.92 ± 10.28)个,两组细胞迁移数量相比,P<0.05.观察组处于细胞周期G0/G1、S和G2/M期的细胞比例分别为62.3%±1.9%、23.0%±1.2%和14.7%±1.8%,对照组处于细胞周期G0/G1、S和G2/M期的细胞比例分别为53.8%± 1.8%、19.1%±0.4%和27.1%±2.2%.与对照组比较,观察组处于G0/G1期和S期的细胞比例增加,而G2/M期的细胞比例减少,P均<0.05.观察组细胞cyclin D2、cyclin E2和CDK2蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05).结论 转染ZNF268基因干扰片段转染可促进SKOV-3细胞增殖,抑制细胞迁移,阻滞细胞于G0/G1期和S期.其机制可能是通过上调细胞周期蛋白cyclin D2、cyclin E2和CDK2表达实现的.
