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miR-33a-5p对骨肉瘤细胞Saos-2增殖的影响及其机制
目的 观察miR-33a-5p对骨肉瘤细胞Saos-2增殖的影响,并探讨其相关机制.方法 采用Real time-PCR法检测骨肉瘤细胞Saos-2及正常人成骨细胞hFOB1.19中miR-33a-5p mRNA相对表达量.将对数生长期的骨肉瘤细胞Saos-2分为两组,分别转染miR-33a-5p mimics(mimics组)及Scramble(对照组).采用MTT法检测两组培养24、48、72、96及120 h细胞增殖能力,细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力(以克隆形成率表示),流式细胞术比较细胞周期,Westen blotting法检测细胞周期蛋白激酶2(CDK2)、CDK4、细胞周期蛋白D(CyclinD)及Cy-clinE蛋白相对表达量.结果 骨肉瘤细胞Saos-2及正常人成骨细胞hFOB1.19中miR-33a-5p mRNA相对表达量分别为2.65±0.43和24.32±3.21,两者比较P＜0.01.随着培养时间延长,两组细胞增殖能力均呈升高趋势;与对照组同时间点比较,mimics组细胞增殖能力均降低(P均＜0.01).mimics组和对照组克隆形成率分别为25.34％±3.46％、53.27％±5.82％,两组比较P＜0.01.mimics组和对照组分别有46.37％±4.28％、30.64％±3.52％的细胞处于G1期,分别有13.25％±1.25％、22.62％±2.01％的细胞处于G2期,两组比较P均＜0.01.mimics组CDK2、CDK4、CyclinD、CyclinE蛋白相对表达量均低于对照组(P均＜0.01).结论 骨肉瘤细胞Saos-2中miR-33a-5p表达降低,上调其表达可抑制细胞增殖;下调CDK2、CDK4、Cyclin D及Cyclin E等细胞周期相关蛋白的表达可能为miR-33a-5p的作用机制.
关键词： 骨肉瘤 Saos-2细胞 miR-33a-5p 细胞增殖
