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miR-101对胃癌化疗耐药的影响及其机制
目的 探讨微小RNA-101(miR-101)对胃癌化疗耐药的影响及其机制.方法 选择人正常胃黏膜上皮细胞GES1(以下称GES1细胞)、胃癌细胞SGC-7901(以下称SGC-7901细胞)、顺铂耐药胃癌细胞SGC-7901(以下称SGC-7901/DDP细胞),采用实时荧光定量PCR法检测3种细胞miR-101、c-met、MDR1 mRNA表达,采用Western blotting法检测3种细胞c-met、P-gp蛋白表达.选择SGC-7901/DDP细胞,随机分为miR-101 mimic组及阴性对照组,分别给予miR-101 mimic(miR-101模拟物)和mimic control(阴性对照)干预,采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法检测MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-101 mimic组和阴性对照组下游靶基因c-met荧光素酶活性.结果 与GES1细胞比较,SGC-7901细胞、SGC-7901/DDP细胞miR-101 mRNA相对表达量明显降低,c-met mRNA和蛋白相对表达量明显升高,且以SGC-7901/DDP细胞变化更明显(P均<0.05).与GES1细胞比较,SGC-7901细胞、SGC-7901/DDP细胞MDR1 mRNA、P-gp蛋白相对表达量明显升高,且以SGC-7901/DDP细胞变化更明显(P均<0.05).miR-101 mimic组MDR1 mRNA、P-gp蛋白相对表达量明显低于阴性对照组(P均<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-101能与c-met 3′-UTR结合,并且miR-101 mimic组荧光素酶活性明显低于阴性对照组(P<0.05).结论 胃癌细胞miR-101低表达;miR-101可能通过抑制c-met表达逆转胃癌细胞的化疗耐药.
