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鸡冠花红双峰双波长光度法测定人血清中总蛋白质
目的:探索一个定量分析蛋白质的新方法.方法:研究发现在pH 2.5左右的B-R缓冲溶液中,鸡冠花红与血清蛋白质在室温下能迅速结合形成玫瑰红色复合物,该复合物在585 nm处有正吸收峰,在520 nm处有负吸收峰.研究了反应佳条件,建立了蛋白质-鸡冠花红双峰双波长光度法测定蛋白质.结果:所测蛋白质在75~400 mg/ml与摩尔吸光度有良好线形关系;用于人血清样品中总蛋白的测定,所得结果满意,回收率在97.62%~100.53%.结论:本方法快速、简便、准确度高、选择性好,生物体液中大部分常见物质均不产生干扰.
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鸡冠花红分光光度法测定血清白蛋白的研究
目的:建立一种灵敏而简单的分光光度法测定血清白蛋白的新方法.方法:在pH 3.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,鸡冠花红与蛋白质相互作用形成一种生物超分子复合物,导致鸡冠花红发生褪色反应,大吸收波长不变,但吸光度值降低,利用吸光度值的变化可以对蛋白质进行分光光度分析.结果:在佳实验条件下,大吸收波长为 536 nm,表观摩尔吸光系数为 2.6×105 L/mol·cm,测定人血清白蛋白的线性范围为 0.5~60.0 mg/L,工作曲线为ΔA=0.0032+0.0008C(mg/L),应用于实际人血清样品的测定,结果同经典的考马斯亮蓝G-250法一致.结论:本方法简单、灵敏、选择性好,可用于实际人血清样品的测定.