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淋病、梅毒和尖锐湿疣三联金标试纸条的制备及其应用
目的:建立能同时检测梅毒螺旋体(TP)血清抗体、淋病奈瑟菌(NG)PIA-PIB及人乳头瘤病毒(HPV)L1抗原的三联金标试纸条并进行临床标本检测.方法:梅毒螺旋体tpN15-17-47和淋病奈瑟菌pIA-pIB融合基因、人乳头瘤病毒L1基因原核表达系统在IFFG诱导下表达目的重组蛋白抗原rTpN15-17-47、rPIA-PIB和rL1.采用SDS-PAGE观察表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白.参照文献用常规方法制备能同时检测TP血清抗体、PIA-PIB及HPV L1抗原的三联金标试纸条.分别建立TpN15-17-47-IgG-ELISA、PIA-PIB-ELISA和L1-ELISA作为对照.采用三联金标试纸条和上述ELISAs检测120例梅毒病人血清、65例淋病病人脓性分泌物、45例尖锐湿疣组织标本.结果:三联金标试纸条与TpN15-17-47-IgG-ELISA检测梅毒血清标本的阳性率分别为91.7%和96.6%.三联金标试纸条与PIA-PIB-ELISA检测淋病脓性分泌物标本的阳性率分别为75.4%和86.2%.三联金标试纸条与LI-ELISA检测尖锐湿疣组织标本的阳性率分别为71.1%和82.2%.所有ELISAS检测抗体或抗原的阳性率虽均高于三联金标试纸条.但无显著性差异(χ21=1.55-2.73,P>0.05).三联金标试纸条与三种ELISAs对健康人血清、非淋病脓性分泌物和包皮组织标本检测结果均为阴性.结论:本研究成功地建立了快速、敏感和特异的能同时检测TP血清抗体、NG PIA-PIB和HPV L1抗原的三联金标试纸条.
关键词: 淋病/梅毒/尖锐湿疣 抗原/抗体 三联金标试纸条 检测