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人子宫癌基因文献资料
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人子宫颈癌基因HCCR-2反义真核表达载体的构建及鉴定
目的 克隆人子宫癌基因HCCR-2并构建其反义真核表达载体.方法 从人肝癌细胞株HepG2提取RNA,利用RT-PCR方法,克隆出一包括HCCR-2编码区的长约1 kb的片段,并将其与T载体连接,测序证实无误后,用Sa1 Ⅰ、Sac Ⅱ双酶切重组T载体,然后将该片段反向插入真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点,后对重组真核表达载体进行双酶切鉴定.结果 RT-PCR扩增出一长约1 kb的HCCR-2片段,琼脂糖凝胶电泳显示目的片段成功反向连接到plRES2-EGFP载体上.结论 成功克隆了HCCR-2基因并构建了其反义真核表达载体pIRES2-EGFP/HCCR-2(-).
