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AEG1文献资料
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AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究
目的 研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境.方法 用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组；采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting 检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化；采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌.结果 与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2 细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低.转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1β mRNA均较对照组和空白组明显增强(P均＜0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均＜0.05)；转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1β mRNA均较对照组和空白组降低(P均＜0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均＜0.05).结论 成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌.
