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联合检测E2F3a和CASP8AP2表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病预后中的意义
目的 探讨联合检测E2F3a和CASP8AP2的表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后判断中的意义.方法 选取2008年3月至2010年7月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL患儿141例,其中男97例,女44例;确诊时年龄1.2～15.5岁,中位数5.2岁.采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测141例ALL患儿的E2F3a和CASP8AP2的基因表达水平.利用受试者工作特征(ROC)曲线确定E2F3a和CASP8AP2表达水平的佳分界点,将患儿分为高表达组和低表达组,比较其预后差异.Cox回归方法分析E2F3a和CASP8AP2的联合表达水平的预后意义.结果 E2F3a和CASP8AP2双低表达组儿童ALL的5年无复发生存(RFS)率、无病生存(EFS)率和总生存(OS)率分别为(58.9±10.0)％、(56.0±9.9)％ 和(72.0±9.0)％,均明显低于双高表达组[(94.9±2.5)％、(93.7±2.7)％ 和(96.2±2.2)％],差异均有统计学意义(均P<0.05).E2F3a和CASP8AP22个基因均低表达的患儿与其他患儿相比,其预后很差;2个基因均低表达与MLL重排、诱导治疗结束时微小残留病水平是儿童ALL的独立预后因素.结论 初诊E2F3a和CASP8AP2低表达的ALL患儿预后差,联合分析E2F3a与CASP8AP22个基因的表达水平能更准确地判断预后、预测复发.
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E2F3a在U251胶质瘤细胞中的功能研究
背景与目的:E2F3a是一种重要的转录激活因子,在多种肿瘤组织中均呈现表达上调.E2F3a在恶性化程度较高的神经胶质瘤中表达较高,目前它在胶质瘤细胞中的功能尚不清楚.本文的目的是研究E2F3a对U251胶质瘤细胞周期和凋亡的影响.方法:通过脂质体介导质粒转染在U251细胞中过表达E2F3a;用Westernblotting检测细胞内E2F3a蛋白质的表达水平;用PI-核DNA染色结合流式细胞术分析细胞周期分布;用Annexin V-PE和7-AAD染色结合流式细胞术分析细胞凋亡比例;用实时荧光定量PCR方法测定细胞内A2、B1、D1和E细胞周期素mRNA的相对表达水平.结果:与空载体转染对照组相比,E2F3a过表达可将位于S期的细胞比例提高28％(P＜0.01),将位于G0/G1期和G2/M的细胞比例分别降低15％和13％(P＜0.01).E2F3a过表达对细胞凋亡无明显影响.进一步研究发现,E2F3a可显著上调细胞周期素D1和E的mRNA表达,而不影响周期素A2和B1的mRNA表达.结论:E2F3a是胶质瘤细胞增殖的促进因子,它可通过上调细胞周期素D1和E的表达加速细胞由G1期进入S期.
