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促红细胞生成素对输尿管梗阻解除后幼鼠肾脏水通道蛋白2表达及功能的影响
目的：探讨促红细胞生成素（EPO）对输尿管梗阻-解除梗阻后（BUO-R）幼鼠肾脏水通道蛋白2（AQP2）表达及功能的影响。方法幼年 SD 大鼠32只，按随机数字表法随机均分为 BUO 组、BUO-R 组、BUO-R ﹢ EPO 组和假手术（Sham）组，每组8只。实验组大鼠均行双侧输尿管结扎，BUO 组梗阻24 h 后处死；BUO-R 组和 BUO-R ﹢ EPO 组梗阻24 h 后解除梗阻，BUO-R ﹢ EPO 组分别于解除梗阻后2 h、6 h、12 h、24 h 和36 h 腹腔注射 EPO（每次剂量500 U/ kg），48 h 后处死；BUO-R 组在相同时间点腹腔注射等量9 g/ L 盐水，48 h后处死；Sham 组只分离输尿管，不结扎，72 h 后处死。幼鼠处死前，代谢笼内收集尿液进行渗透压检测。留取双侧肾脏标本，采用 Real-time PCR、免疫组织化学及 Western blot 检测各组肾脏组织中 AQP2 mRNA 及蛋白表达水平。结果 Sham 组尿液渗透压高，BUO-R ﹢ EPO 组次之，BUO-R 组低（P ﹤0.05）。免疫组织化学结果显示 BUO 组、BUO-R 组和 BUO-R ﹢ EPO 组集合管管壁变薄、管腔增大，经 Image-Pro Plus 图像分析软件统计分析，BUO 组内髓集合管 AQP2阳性染色弱于其他3组，Sham 组表达强，BUO-R ﹢ EPO 组和 BUO-R 组次之（P ﹤0.05）。经 Western blot 进一步验证，BUO 组 AQP2蛋白表达水平低于 BUO-R ﹢ EPO 组、BUO-R 组和 Sham组（P ﹤0.05）。经 Real-time PCR 检测，4组幼鼠肾脏组织中 AQP2 mRNA 表达水平差异有统计学意义（ P ﹤0.05），Sham 组表达多，是 BUO 组的（24.30±1.03）倍、BUO-R 组的（10.60±1.05）倍、BUO-R ﹢ EPO 组的（5.70±1.01）倍。结论 EPO 可促进 BUO-R 幼鼠肾脏 AQP2 mRNA、蛋白表达及功能恢复。
