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  • 恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白基因的克隆与表达

    作者:常平;朱德新;杜江;封志纯

    目的了解恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白的表达,检测其抗原性和免疫原性.方法采用PCR扩增恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白成熟肽全基因序列并TA克隆,酶切PCR产物构建pGEX-47原核表达质粒,转化BL21,IPTG诱导表达相对分子质量为47重组蛋白,并检测其抗原性及免疫原性.结果1.扩增PCR产物约1300 bp,测序结果与相对分子质量为47蛋白基因序列相同;2.构建原核表达质粒pGEX-47,纯化的重组蛋白SDS-PAGE分析在相对分子质量为47处,薄层扫描分析表达率为15.8%;3.Dot blot分析显示其有抗原性,小鼠免疫实验证实其有免疫原性.结论扩增相对分子质量为47蛋白的成熟肽全基因序列,在原核细胞得到表达,表达产物具有抗原性和免疫原性.

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