首页 > 文献资料
-
蛋白质组学技术分析Long Evans大鼠眼优势柱可塑性终止相关蛋白
目的利用二维电泳-质谱技术分析Long Evans大鼠初级视皮层中与眼优势柱终止相关的蛋白质,探索蛋白质组学技术在视觉可塑性研究中的应用.方法取100d龄Long Evans大鼠通过向其初级视皮层中灌注硫酸软骨素酶建立成年眼优势柱移动的动物模型,然后分别提取22 d龄大鼠、100 d龄大鼠和100 d龄硫酸软骨素酶灌注大鼠的初级视皮层灰质总蛋白,利用二维电泳-质谱技术分析与眼优势柱终止相关的蛋白质.结果通过双向电泳确定了与眼优势柱终止相关的4个蛋白质点,质谱分析鉴定了其中2种蛋白质.这2种蛋白为磷脂酰乙醇胺结合蛋白和胶质纤维酸性蛋白.结论二维电泳-质谱技术可以有效地分离和鉴定视皮层中的特殊蛋白质,随着技术的进步和完善,蛋白质组学技术必将在视觉可塑性研究中占有重要地位.
关键词： 二维电泳 视皮层 Long Evans大鼠 蛋白质组 硫酸软骨素 -
蛋白质组学技术分析眼优势柱可塑性相关蛋白
目的利用二维电泳-质谱(2-DE/MS)技术分析Long Evans大鼠初级视皮层中与眼优势柱可塑性相关的蛋白质.方法取22 d龄Long Evans大鼠通过向其初级视皮层中灌注放线菌酮建立幼年眼优势柱不移动的动物模型,然后分别提取22 d龄大鼠、100 d龄大鼠和22 d龄放线菌酮灌注大鼠的初级视皮层灰质总蛋白,利用2-DE/MS技术分析与眼优势柱可塑性相关的蛋白质.结果通过2-DE/MS技术鉴定了与眼优势柱终止相关的5种蛋白质,这5种蛋白质与蛋白质的更新相关,分别为proteasome protein p45/sug、Malate dehydrogenase、Proteasome alpha 1 subunits、adolase A和septin 4.结论二维电泳-质谱(2-DE/MS)技术可以有效地分离和鉴定视皮层中的特殊蛋白质.随着蛋白质组学技术的进步和完善,必将在视觉可塑性研究中占有重要地位.
关键词： 二维电泳 视皮层 蛋白质组 放线菌酮 Long Evans大鼠 -
成年与幼年Long Evans大鼠视皮层蛋白的二维电泳分析
目的利用双向电泳技术比较正常成、幼年Long Evans大鼠初级视皮层蛋白质组表达差异,探索蛋白质组学技术在视觉发育研究中应用的可能性.方法 22 d龄和100 d龄Long Evans大鼠各3 只,过量戊巴比妥钠处死,切取其初级视皮层的灰质,裂解抽提总蛋白,双向电泳分离总蛋白,比较2 组大鼠初级视皮层蛋白质表达差异.结果胶图差异分析发现幼年鼠初级视皮层中有12个蛋白质点表达较丰富,成年鼠初级视皮层中有16个蛋白质点表达较丰富.结论正常成、幼年Long Evans大鼠初级视皮层蛋白质组存在明显差异,蛋白质组学技术可以应用于视觉发育方面的研究.
关键词： 二维电泳 视皮层 Long Evans大鼠 -
Long Evans大鼠视网膜神经节细胞培养与鉴定
目的建立Long Evans大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)体外培养的方法,为RGCs的体外实验研究奠定基础.方法出生后1～3 d的Long Evans大鼠视网膜神经上皮层,胰蛋白酶+透明质酸酶消化制成单细胞悬液,用DMEM培养液进行培养,观察细胞生长规律,图像分析系统分析有突起的RGCs数目、胞体面积和长的突起长度,Thy1.1单克隆抗体和微管相差蛋白2多克隆抗体荧光双标法鉴定RGCs.结果 Long Evans大鼠RGCs体外培养存活4 d;荧光双标显示RGCs纯度为80%～90%.结论在普通培养基中Long Evans大鼠RGCs体外培养能获成功.胰蛋白酶+透明质酸酶联合消化较单独用胰蛋白酶消化效果好.
关键词： 视网膜神经节细胞 细胞培养 Long Evans大鼠 -
正常Long Evans大鼠不同发育阶段闪光视觉诱发电位波形的比较
目的比较3组不同发育阶段正常Long Evans大鼠的闪光视觉诱发电位(Flash visual evoked potential, F- VEP)的异同,探索闪光视觉诱发电位波形在视觉发育过程中的变化规律.方法随机抽取不同发育阶段的Long Evans 大鼠50只,分成3组.每组大鼠用乙醚麻醉,使用视觉电生理检查系统采集其F-VEP.结果未睁眼组未记录到大鼠明显的F-VEP波形,睁眼后可记录到大鼠F-VEP波形,但成年组和幼年组F-VEP主波(Pmax)的潜伏期和振幅有显著性差异, 成年组与幼年组Long Evans 大鼠相比,F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小.结论随着发育,Long Evans 大鼠F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小.F-VEP对大鼠视觉发育阶段的判断具有一定价值.
关键词： Long Evans大鼠 闪光视觉诱发电位 -
Long Evans和Wistar大鼠亚硒酸钠诱导白内障模型的比较
目的:比较Long Evans和Wistar大鼠在建立亚硒酸钠诱导的白内障动物模型中的异同.方法:给未睁眼的10 d龄Wistar大鼠(10只)和Long Evans大鼠(10只)一次性腹腔注射亚硒酸钠(30 μmol/kg)造模,在所有动物全部睁眼后(即实验第7 d),用裂隙灯观察晶状体混浊情况并进行评分.结果:所有大鼠均安全诱导出白内障动物模型,但Wistar大鼠诱导后的晶状体混浊情况相对单一,而Long Evans大鼠具有多样性,Wistar大鼠的晶状体混浊程度明显重于Long Evans大鼠(P＜0.01).结论:Wistar大鼠经亚硒酸钠诱导后,晶状体的混浊情况较Long Evans大鼠相对稳定,便于对照研究,在研究治疗与预防白内障方面较Long Evans大鼠更适合.Long Evans大鼠经亚硒酸钠诱导后,晶状体混浊呈现出多样性,更接近于白内障的临床表现.
关键词： Wistar大鼠 Long Evans大鼠 亚硒酸钠 白内障 -
新生Long Evans大视网膜小胶质细胞原代培养及鉴定
目的:建立稳定高产的新生LongEvans大鼠视网膜小胶质细胞(retina microgliacell RMG)体外培养、分离的方法.方法:取出生3d内的LongEvans新生大鼠视网膜神经上皮层进行混合细胞培养,10～12d后振荡分离,纯化培养得到小胶质细胞;小胶质细胞的特异性标记IB-4及CD11b进行组化及细胞免疫荧光鉴定,扫描电镜观察细胞表面突起.结果:得到纯度较高的小胶质细胞,IB-4组化及CD11b细胞免疫荧光鉴定纯度分别为94.5%和95.8%,扫描电镜观察细胞表面为棘状突起,明显与巨噬细胞的细胞表面区别.结论:本方法可以得到纯度高的视网膜小胶质细胞.
关键词： 视网膜小胶质细胞 细胞培养 Long Evans大鼠
