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突变诱导文献资料
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乙酰基亚硝基脲诱变的一种角膜混浊小鼠及其突变基因的染色体定位
背景 乙酰基亚硝基脲(ENU)诱导小鼠基因突变是研究基因功能及建立人类疾病动物模型的一种有效手段. 目的 研究ENU诱变获得的1只角膜混浊小鼠角膜组织形态变化,并对其突变基因进行染色体定位.方法 选用8～10周龄的C57BL/6J (B6)雄鼠40只,腹腔内注射ENU.将注射后的雄鼠与同品系母鼠交配,在其后代小鼠中筛选眼部突变个体,并将突变个体与同品系小鼠配种以确定是否遗传.对ENU诱变获得1只角膜混浊小鼠的角膜行组织病理学观察.繁殖[(B6×D2) F1×B6] N2角膜混浊小鼠,用平均分布于小鼠染色体上的微卫星标记对N2小鼠染色体进行扫描.采用优势对数计分法(LOD)判定突变基因与微卫星是否连锁. 结果 将角膜呈现混浊小鼠与B6背景小鼠配种,在其59只后代中出现19只类似表型的突变小鼠.角膜组织病理学检查发现,该例角膜混浊小鼠角膜基质增厚,出现新生血管和炎性细胞浸润,成纤维细胞明显增多.突变基因与微卫星间的连锁分析发现,26个N2样品中突变基因与位于小鼠2号染色体63.42 cM处的D2Mi307位点发生3例交换,LOD值为3.79,该突变基因位于小鼠第2号染色体. 结论 成功获得角膜混浊小鼠并将其突变基因初步定位于2号染色体,有望为人类角膜混浊疾病研究提供一种新的小鼠模型.
