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  • 表皮生长因子受体与Dok1 PTB结构域结合关键位点的确定

    作者:阎志勇;蔡太生;张勇;汤善均;路长林;何成

    目的:确定表皮生长因子受体(EGFR)与Dok1 PTB结构域结合的关键氨基酸残基位点.方法:合成包含磷酸化的酪氨酸残基的EGFR胞内域的5个小肽片段,利用谷胱苷肽S转移酶共沉淀技术确定能够抑制Dok1 PTB结构域与激活的EGFR结合的小肽.结果:pY1086或pY1148小肽能抑制激活的EGFR与Dok1 PTB结构域的结合.结论:pY1086和pY1148是激活的EGFR与Dok1 PTB结构域结合的关键位点.

  • Doks PTB结构域与EGFR特异性结合

    作者:阎志勇;吴爱群;张勇;路长林;何成

    目的:探讨Doks家族的PTB结构域在识别上游分子时的特异性.方法:利用裂解大量内源性表达表皮生长因子受体(EGFR)的COS-7传代细胞株获取EGFR,利用大肠杆菌表达GST融合蛋白GST1PTB、GST4PTB和GST5PTB,采用GST共沉淀技术检测Dok1、4和5的PTB结构域能否与EGFR结合.结果:Dok1的PTB结构域,而非Dok4和Dok5的PTB结构域,能够特异性地与被激活的EGFR结合,不能与未激活的EGFR结合.结论:Doks家族的PTB结构域功能有差别,即PTB结构域在识别上游分子时具有特异性.

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