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白喉毒素A基因转染对人肺腺癌细胞体内外生长的影响
目的:探讨白喉毒素A(DTA)基因在肺腺癌基因治疗中的作用.方法:①体外细胞毒试验:对转染DTA基因的人肺腺癌细胞A549(A549/DTA)、转染空载体的人肺腺癌细胞A549(A549/DTA-)和野生型A549,采用MTT法测定四环素作用72 h后的细胞存活率.②动物实验:将1.2×107的A549细胞接种于裸鼠皮下,当肿瘤长至约350 mg时,随机分组:转DTA基因治疗组,荷瘤裸鼠每次给予含DTA基因的病毒上清0.4 ml瘤体注射;空载体组给予0.4 ml含空载体的病毒上清;对照组给予0.4 ml生理盐水,均2 d 1次,连续3周;从开始注射病毒上清之日起,每周2次测量肿瘤大小,按公式计算肿瘤相对质量.3周后处死动物,瘤组织作病理分析.结果:①细胞存活率:转空载体的A549与野生型A549形态无明显改变,而转染DTA基因的A549细胞体积明显缩小,并有细胞碎片.②瘤体注射DTA基因的病毒上清可使皮下肿瘤显著缩小,从注射之日起至21 d,肿瘤体积缩小,而空载体组、对照组在相同时间内肿瘤体积增加.转DTA基因治疗的瘤组织出现了细胞坏死和凋亡,而空载体组及对照组瘤组织无坏死及细胞凋亡征象.结论:四环素调控白喉毒素A基因对肺腺癌有一定的治疗作用.
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转染白喉毒素基因对人肺腺癌细胞的影响
目的探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞(A549)的影响.方法对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞(A549/DTA),转空载体的人肺腺癌细胞(A549/DTA-)野生型A549细胞,采用MTT法测定四环素作用72h后的细胞存活率.动物实验:12只裸鼠随机分为转基因组、空载体组和对照组,每组4只,将1.2×107A549/DTA细胞,A549/DTA-细胞及野生型A549细胞分别接种于相应的裸鼠皮下,给裸鼠饮含四环素(1μg/ml)的水,成瘤后,每周2次测量瘤体大小,计算瘤体重量.结果 A549/DTA细胞存活率较A549/DTA-细胞,A549细胞存活率明显下降(P＜0.01),而A549/DTA-细胞与A549细胞存活率无差别(P＞ 0.05).空载体组与对照组的裸鼠全部长出肿瘤,且肿瘤生长迅速,而转基因组有1只裸鼠未长出肿瘤,肿瘤生长缓慢,前者瘤体的重量是后者的3倍.结论体外转染白喉毒素A基因可杀伤人肺腺癌细胞并降低人肺腺癌细胞的致瘤性.
