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配基结合实验文献资料
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听源性惊厥大鼠惊厥后NMDA受体NR1亚基蛋白表达和功能研究
目的:探讨惊厥后大脑皮质N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体亚基NR1蛋白表达及其功能改变与癫痫发病机制的关系.方法:P77PMC大鼠按惊厥后不同时间随机分为6组,免疫组化每组6个样本,配基结合实验每组5个样本,制备大脑冰冻切片和大脑皮质突触膜.利用免疫组化技术,观察听源性癫痫易感大鼠P77PMC惊厥后不同时间NR1亚基蛋白的表达,应用配基结合实验观察听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后大脑皮质突触膜对3H-MK801的结合改变,以及NMDA受体激动剂对其结合的影响.结果:大脑皮质在惊厥后4 h NR1蛋白表达即开始增加,24～48 h达高峰.反应体系中无任何NMDA受体激动剂时,惊厥后大脑皮质突触膜对 3 H-MK801的结合有增加趋势,但差异无显著性(P>0.05);当反应液中加入NMDA 受体激动剂时,惊厥后大脑皮质突触膜对 3 H-MK801的结合明显增加,除惊厥后4 h与正常对照组比较差异无显著性外,其他惊厥后各时间点与正常对照组比较差异均有显著性(P<0.01) .结论:听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后,大脑皮质NMDA受体NR1亚基蛋白表达增加,NMDA受体对其激动剂的敏感性增加,提示NR1亚基参与了P77PMC大鼠惊厥的发生与发展;受体兴奋性的改变可能与神经网络兴奋性增高及癫痫易感性的保持有关.
关键词： 癫痫 N-甲基-D-门冬氨酸受体 蛋白表达 配基结合实验
