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重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析
目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11 000差异(异常)条带的蛋白质组成.方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11 000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平.结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶.免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016).结论:MG胸腺增生组织11 000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等.
关键词: 重症肌无力 蛋白质组学 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 双向电泳 4.1R蛋白 -
心力衰竭小鼠心肌组织中4.1R蛋白的表达
目的:探讨心力衰竭(心衰)小鼠心肌组织中4.1 R蛋白的表达及其与心功能的关系。方法:42只雄性健康小鼠随机分为心衰组(n=22)和对照组(n=20)。处死小鼠后迅速取出心肌组织,行HE染色,计算左室质量指数和心肌病理积分;并采用免疫组化染色及免疫荧光标记法检测心衰小鼠心肌组织4.1R蛋白的表达。结果:与对照组比较,心衰组左室质量指数和心肌病理积分升高( t=190.668, Z=31.915, P均<0.05);心衰组心肌组织4.1R蛋白阳性细胞百分比高于对照组(t=18.607,P=0.001)。 Pearson直线相关分析显示,心衰组心肌组织4.1R蛋白阳性细胞百分比与左室质量指数呈正相关(r=0.766,P<0.001)。结论:心衰小鼠心肌组织中4.1R蛋白的表达增加,干预4.1R蛋白的表达可能对心衰的治疗及预后有一定的意义。
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4.1R蛋白在老龄心力衰竭小鼠心肌组织中的表达
目的 探讨4.1R蛋白在老龄心力衰竭小鼠心肌组织中的表达水平.方法 将40只老龄雄性健康小鼠均分为心力衰竭组(n=20)和对照组(n=20),常规喂养8周后应用超声评估心功能,处死小鼠后迅速取出心脏,计算左室质量指数,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组老龄小鼠心肌细胞4.1R蛋白mRNA量,比较两者之间的差别.结果 与对照组比较,心力衰竭组老龄小鼠心率加快,左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)增大,左室射血分数(LVEF)降低,左室质量指数增加,心肌组织4.1R蛋白mRNA表达量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 4.1R蛋白mRNA在老龄心力衰竭小鼠心肌组织上表达量明显增加,提示4.1R蛋白可能与心力衰竭的发生发展有关.