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Cyto Trap酵母双杂交文献资料
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Cyto Trap 酵母双杂交系统筛选 p85α蛋白相互作用蛋白
目的：筛选与p85α蛋白发生相互作用的新蛋白质分子。方法 PCR扩增小鼠p85α基因全长，并将此基因重组入pS O S载体，构建诱饵质粒pS O S‐p85α，经酶切及测序鉴定构建正确后将其转化酵母菌cdc25 Hα，检测其在酵母中的表达及有无自激活作用，并利用CytoTrap酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白p85α相互作用的蛋白质分子。结果成功获得重组诱饵质粒pS O S‐p85α，并验证其可在酵母细胞中表达诱饵蛋白pS O S‐p85α，且诱饵质粒在此双杂交系统中无自激活。利用此系统筛选出4个能与p85α相互作用的细胞蛋白，分别为v‐Ki‐ras2克尔斯滕大鼠肉瘤病毒癌基因同族体蛋白KRAS、小鼠着丝粒蛋白K、小鼠多聚嘧啶结合蛋白PTBP1、小鼠雄性激素调节蛋白RP2。结论成功筛选出小鼠p85α蛋白的相互作用蛋白，为进一步研究小鼠p85α蛋白及其相关信号通路的生物学功能提供了新线索。
关键词： p85α蛋白 Cyto Trap酵母双杂交 蛋白质相互作用
