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PIK3R1基因及其编码蛋白在宫颈鳞癌中的表达及临床意义
目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 1,PIK3R1)及其编码蛋白p85α在宫颈鳞癌中的表达及临床价值.方法:选取38例宫颈鳞癌组织和39例良性宫颈组织,采用HE染色观察鳞癌宫颈和良性宫颈的形态,免疫组织化学法检测p85α蛋白的表达;分析宫颈鳞癌组织中p85α的表达与各临床参数的相关性;选取19例宫颈鳞癌组织和19例良性宫颈组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测PIK3R1和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(gene of phosphatase and tension homology dele-ted on chromsome ten,PTEN)的表达,并分析二者的相关性.结果:与良性宫颈组织相比,p85α蛋白在宫颈鳞癌组织中表达明显降低(P<0.01);病理分期越高,p85α的表达越低(P<0.01),有远处转移的肿瘤组织中p85α的表达较无远处转移的肿瘤组织表达低(P<0.05).与良性宫颈组织相比,PIK3R1和PTEN在宫颈鳞癌组织中的表达均明显下调(P<0.01).相关分析表明,PIK3R1和PTEN在宫颈鳞癌中表达呈中度相关(r=0.567,P=0.011).结论:PIK3R1及编码蛋白p85α在宫颈鳞癌中表达均下调,二者在宫颈鳞癌中可能作为抑癌基因发挥关键作用.
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Cyto Trap 酵母双杂交系统筛选 p85α蛋白相互作用蛋白
目的：筛选与p85α蛋白发生相互作用的新蛋白质分子。方法 PCR扩增小鼠p85α基因全长，并将此基因重组入pS O S载体，构建诱饵质粒pS O S‐p85α，经酶切及测序鉴定构建正确后将其转化酵母菌cdc25 Hα，检测其在酵母中的表达及有无自激活作用，并利用CytoTrap酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白p85α相互作用的蛋白质分子。结果成功获得重组诱饵质粒pS O S‐p85α，并验证其可在酵母细胞中表达诱饵蛋白pS O S‐p85α，且诱饵质粒在此双杂交系统中无自激活。利用此系统筛选出4个能与p85α相互作用的细胞蛋白，分别为v‐Ki‐ras2克尔斯滕大鼠肉瘤病毒癌基因同族体蛋白KRAS、小鼠着丝粒蛋白K、小鼠多聚嘧啶结合蛋白PTBP1、小鼠雄性激素调节蛋白RP2。结论成功筛选出小鼠p85α蛋白的相互作用蛋白，为进一步研究小鼠p85α蛋白及其相关信号通路的生物学功能提供了新线索。
关键词： p85α蛋白 Cyto Trap酵母双杂交 蛋白质相互作用
