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不同温度条件下唾液斑酯酶表型的可测期限
目的探讨不同温度条件下滤纸唾液斑酯酶的可测期限.方法应用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳及固蓝RR染色方法,检测4℃、室温(18～25℃)及37℃条件下保存的滤纸上唾液斑酯酶表型的可测期限.结果滤纸唾液斑4℃保存12周,室温保存6周,37℃保存5天,均可正确检出酯酶表型.唾液斑酯酶的三种表型F、FS和S,F和S表型唾液斑在4℃保存12周,室温保存6周,37℃保存5天,均可正确检出;FS表型唾液斑在4℃保存13周,室温保存7周,37℃保存6天,均可正确检出.结论 4℃保存的唾液斑酯酶表型的可测期限比室温及37℃条件下保存的长.在同样温度条件下保存的唾液斑,FS表型的可测期限比F和S表型的长.
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唾液斑口腔上皮细胞端粒长度变化在法医学实践中的应用研究
目的:探讨人类唾液斑中口腔上皮细胞端粒长度变化与年龄的相关性及其稳定性,探讨2种方式提取的检材及其不同放置时间后口腔上皮细胞端粒长度是否有差异,拟为法医学通过微量易得检材推断年龄提供依据.方法:选取40例不同年龄段健康人唾液,分为童年组(0～6岁)、少年组(7～17岁)、青年组(18～40岁)、中年组(41～65岁)、老年组(＞66岁)5个年龄组,每组8人,分别制成新鲜口腔拭子和不同时间段(1、7、14、28 d)的唾液斑,用磁珠法提取样本中的DNA,通过荧光PCR(聚合酶链反应)相对定量法检测端粒DNA限制性酶切段长度变化.结果:不同组间端粒长度有明显差异(F=7.138,P=0.018),年龄回归方程:Y=-75.006X+ 101.193,端粒TRF平均长度随年龄增加而逐渐缩短,并呈不均衡趋势.检材提取方式及检材新旧程度对检测到的TRF结果没有显著影响(P=0.740,P=0.740,P=0.958,P=0.324).结论:唾液斑中口腔上皮细胞端粒长度随年龄增加而缩短,并且呈规律性改变;2种方式采集的样本及其不同放置时间后的样本端粒长度无明显差异,说明唾液斑中口腔上皮细胞端粒长度具有一定的稳定性,故可通过唾液斑中口腔上皮细胞端粒长度推断个体年龄.
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直接扩增法在血痕、肋软骨和唾液检材中的应用
目的 采用Identifiler Direct PCR试剂盒直接扩增法进行棉签擦拭血痕、肋软骨和烟蒂唾液斑DNA分型检验,并评价其应用价值.方法 收集棉签擦拭血痕、烟蒂各20份,肋软骨10份,采用Identifiler Direct PCR试剂盒进行直接扩增及分型检验,以相同检材采用磁珠法/Chelex-100法提取模板DNA后扩增检验结果作为对照,对两组所得结果进行比较分析.结果 棉签擦拭血痕和肋软骨一次检测完整分型率均为100％,分型结果与对照组一致;烟蒂上唾液斑有2份检材第一次未能完整分型,调整方法再次检验后获分型成功.结论 实际检案中的棉签血痕、肋软骨和烟上唾液斑,采用直接扩增法检测,方法简单、快速、稳定、检材用量小,可在实际检案中选择使用.
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瓜子壳上人体脱落细胞DNA检验
1 案例资料1.1 简要案情2012年12月13日,某镇一村民家被盗,经调查和现场勘验确认遗留在现场的大板瓜子壳为嫌疑人所留,提取该检材要求进行DNA检验.1.2 DNA检验送检瓜子壳多呈两瓣前端张开状态,分析应为进食者以手卡住大板瓜子用门牙所嗑.挑选状态基本一致的瓜子壳数个,剪取尖端,加入5％ Chelex-100 120μL及蛋白酶K (20mg/mL) 10μL;振荡后56℃孵育1h,98℃变性10min;用QIAGEN试剂盒进行纯化,Identifiler Plus试剂盒(AB公司,美国)进行PCR扩增;反应体系10μL,模板量4μL,操作按试剂盒和仪器说明书进行.GeneMapper Ⅴ3.2软件进行STR分型.
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咀嚼后槟榔表面唾液斑DNA检验1例
1 案例资料1.1 简要案情某日,3名男子在公共场所寻衅滋事逃逸,警察在现场提取到遗留的3枚嫌疑人咀嚼过的槟榔,要求进行DNA分型.1.2 DNA检验样本处理3枚槟榔中2枚较干燥,表面纤维稀疏蓬松,直接剪取槟榔纤维;1枚表面相对潮湿,用无菌脱脂棉在表面进行擦拭.DNA提取及纯化将上述槟榔纤维和擦拭脱脂棉分别置于1.5mL EP管中,加1 000μL纯水清洗,离心,弃上清,保留约100μL液体和沉淀物;加300 μL20％ Chelex-100溶液和20μL 20mg/mL PK,56℃过夜;振荡,100c℃ 15min;振荡,13 000r/min离心5min.取约400μL上清液,使用纳米磁珠试剂盒进行纯化.
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瓜子壳上唾液斑DNA检验1例
1 案例某日,在某地一大桥洞中发现一具无名男尸,经法医检验,确定为他杀,死因是棍棒致颅脑损伤死亡.现场勘验提取到的主要法医物证为2根带血迹的木棒、5处血迹、4堆瓜子壳、8枚烟蒂.
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唾液斑DNA检验在性侵害案件中的应用
自从STR-PCR技术应用于生物物证的检验,微量生物学检材的DNA检测已成为可能.血液、毛发、骨骼、组织、人体分泌物(精斑、唾液、汗液)等物证检材均可通过DNA检验技术进行基因型分析.注意物证存在的多样性,广泛提取各种DNA物证成为在侦察破案中充分发挥DNA检验技术作用的关键.在一些性侵害案件中,笔者通过搜集受害人身上特殊部位的唾液斑进行DNA检验,弥补了在受害人身上未检出精斑的不足,为案件的侦破提供了突破性证据.
