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肝细胞粘附分子在膀胱移行细胞癌中的表达及意义
目的 通过检测肝细胞粘附分子(hepaCAM)基因在膀胱移行细胞癌(TTCCB)组织中的表达,探讨其在膀胱癌发病中的分子机制.方法 选取TCCB组织15例为TCCB组,正常膀胱组织10例为对照组.以实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测膀胱组织hepaCAM mRNA表达;Western印迹法检测hepaCAM蛋白表达.比较两组hepaCAM mRNA及蛋白表达的差异.结果 与正常膀胱组织比较,TCCB组织hepaCAM mRNA及蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 hepaCAM基因低表达可能是TCCB发病潜在分子机制.
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HepaCAM蛋白通过exosomes途径分泌到细胞外并抑制肿瘤细胞增殖
目的 探讨肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)在肾癌786-0细胞中通过exosomes途径分泌到细胞外及是否可以抑制肿瘤细胞增殖.方法 将携带hepaCAM基因的重组腺病毒质粒瞬时转染786-0细胞,Western blot鉴定hepaCAM基因在786-0中的表达；莫能星(monensin)和二甲基阿米洛利(DMA)处理转染后肿瘤细胞,检测肿瘤细胞上清液及exosomes中hepaCAM蛋白的量的变化.MTT法检测hepaCAM蛋白是否可以抑制肿瘤细胞增殖.结果 成功构建并转染hepaCAM重组腺病毒质粒,在肿瘤细胞上清液中检测到hepaCAM蛋白的分泌,经药物处理后,莫能星明显增加了转染后肿瘤细胞的hepaCAM蛋白的分泌量,而二甲基阿米洛利处理转染后肿瘤细胞,能显著抑制细胞上清液中hepaCAM的分泌量.Western blot进一步证明hepaCAM蛋白存在于exosomes上.成功转染hepaCAM基因的肾癌细胞分泌的exosomes明显抑制了肿瘤细胞增殖.结论 hepaCAM蛋白可能通过exosomes途径分泌到肿瘤细胞外并抑制肿瘤细胞增殖.
