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复合酶法提取山竹中总氧杂蒽酮工艺
目的 以山竹为原料,采用复合酶法提取山竹中总氧杂蒽酮.方法 先以单因素试验明确酶解适宜pH、时间、温度及酶用量,进而采用正交设计及方差分析确定了复合酶法提取山竹总氧杂蒽酮的佳条件.结果 佳条件为:纤维素酶0.5％、蛋白酶0.5％、果胶酶0.5％、漆酶0.5％、温度20℃、时间2h、pH 5.0.结论在此条件下,山竹中总氧杂蒽酮的提取率为10.55％.
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山竹果皮中总氧杂蒽酮对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 将人鼻咽癌CNE2细胞随机分成阴性对照组和不同浓度山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物组.阴性对照组不加药物,正常培养;总氧杂蒽酮提取纯化物组分别以200,400,600,800 μmol·L-1总氧杂蒽酮作用24,48,72 h.采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞增殖的影响,Annexin-V/PI双重染色、碘化丙啶单染进行流式细胞术检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞周期和凋亡的影响.Caspase-3试剂盒检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞Caspase-3酶活化的影响.结果 总氧杂蒽酮提取纯化物随着浓度增加,可显著抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖活性,浓度为371.536 7 μmol·L-1时可诱导人鼻咽癌CNE2细胞出现明显早期凋亡,并且随着药物作用时间的增加(24,48,72 h),凋亡早期癌细胞的比例显著上升(分别为0.03％,10.54％,26.47％)(P＜0.05);总氧杂蒽酮提取纯化物使CNE2细胞G1期细胞比例大幅升高,同时S期细胞比例明显下降;对Caspase-3具有激活作用,Caspase-3酶的活性与药物浓度成正比.结论 山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖有显著抑制作用和促凋亡作用,其作用机制可能与抑制鼻咽癌细胞增殖活性、抑制细胞进入S期和激活Caspase-3有关.
