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自体脂肪基质细胞组织-脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复胫骨缺损及其生物相容性研究
目的:探讨自体脂肪基质细胞组织(SVF)-脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复胫骨缺损及其生物相容性.方法:于2016年4月9日选取辽宁医学院动物实验中心4月龄大白兔40只,随机选取其中1只提取兔SVF组织10 g,体外分离培养脂肪基质细胞并行脂肪基质细胞多向分化(成脂和成骨诱导),以种植密度3×107个/cm2种植于脱细胞骨基质-壳聚糖支架上并制成SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架,将P3代的兔纤维软骨细胞分别种植到SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架(作为SVF组)和脱细胞骨基质-壳聚糖支架(作为对照组)并进行组织学和生物相容性检测,同时将所有大白兔的建立兔胫骨缺损模型,并用上述两种支架进行移植修复治疗,统计分析所有支架第0,4,7,14天的DNA含量、细胞存活率和第0,2,4,8周时兔胫骨骨矿物、骨密度水平及修复疗效、第8周时大弯曲度负荷、抗弯刚度、破坏扰度水平.结果:SVF组第4,7,14天时DNA含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);SVF组第4,7,14天时细胞存活率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);术后第8周,SVF组大体观察可见仿生骨膜大部分完整、有骨痂生长,组织学观察可见软骨内骨化明显、缺损基本修复,免疫组织化学观察可见成熟骨基质部分BMP染色阳性、着色变浅,对照组大体观察可见膜降解呈碎片状、骨端骨痂较硬,组织学观察可见膜材大部分降解且出现幼稚髓腔样结构,免疫组织化学观察BMP轻度表达、软骨基质BMP染色阳性,前者第2,4,8周时骨矿物、骨密度和第8周时大弯曲度负荷、抗弯刚度、破坏扰度水平明显高于后者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架具有良好的生物相容性,SVF可作为骨组织工程的种子细胞,可能通过协同诱导、传导效应等增强骨再生麓力,且具有良好的生物力学效果,有利于促进胫骨骨缺损的修复,值得临床进一步推广.
关键词： 自体脂肪基质细胞组织 脱细胞骨基质 壳聚糖支架 胫骨缺损 生物相容性
