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缺失的变异型文献资料
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血红素加氧酶在大肠杆菌中稳定表达的氨基酸范围的研究
目的确定在原核细胞中呈可溶性稳定表达但不改变活性的血红素加氧酶氨基酸范围.方法应用PCR技术构建了鼠血红素加氧酶-1(RHO-1)和人血红素加氧酶-2(HHO-2)的 N端和C端部分氨基酸缺失的变异型RHO-1和HHO-2,将它们在大肠杆菌中表达并纯化后通过光谱扫描法测定变异型酶与野生型酶的催化活性,确定RHO-1和HHO-2中的N端和C端缺失不影响其可溶性表达及催化活性的氨基酸范围.结果△N8RHO-1(N端缺失8个氨基酸的RHO-1)和△C70 RHO-1在大肠杆菌中表达为可溶性蛋白且催化活性与RHO-1野生型相同,△N20HHO-2和△C77 HHO-2在大肠杆菌中也表达为可溶性蛋白且催化活性与HHO-2野生型相同,而△N9RHO-1和△C75RHO-1在大肠杆菌中表达为包涵体.结论 RHO-1和HHO-2的N端和C端部分氨基酸缺失的突变型酶对其催化功能没有影响,并可在大肠杆菌中稳定可溶性表达.
