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庚肝病毒非结构蛋白文献资料
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庚型肝炎病毒NS5 cDNA片段的表达及其免疫原性的研究
一段长度为880?bp的庚型肝炎病毒cDNA在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到表达。此 cDNA被插入到表达质粒pGEX-5X-1中，位于编码日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶（GST）的DNA序列下游，并与GST处于同一阅读框。用乳糖在37℃下诱导表达出以包涵体形式存在的GST-NS53融合蛋白，并用脲溶法提取了该蛋白；在20℃诱导时，表达出的蛋白大部分可溶，用谷胱甘肽Sepharose-4B亲和层析柱对可溶性的融合蛋白进行了纯化。免疫印迹实验证明，此融合蛋白能被庚型肝炎病人的血清和自制的抗GST血清特异性地识别。用PC gene 软件对NS53氨基酸序列的亲水性和抗原决定簇进行了分析。本研究为庚型肝炎ELISA诊断试剂研制打下了基础。
