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荧光素标记基因探针文献资料
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荧光素标记的庚型肝炎病毒基因探针的制备及应用
参考国内外已完成测序的庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)基因序列,选取毒株间系列较保守的基因片段,并合成与之互补的核苷酸序列(Antisense),用末端转移酶将荧光素-N6-dd ATP标记该片段,制成庚肝病毒基因探针.在严格控制温度的条件下,与固定于硝酸纤维膜(NC膜)上血清斑点杂交,洗膜后与抗-荧光素-碱性磷酸酶(AP)结合,加底物后化学发光自显影判断结果.该方法检测与套式逆转录-聚合酶链反应(Nested RT-PCR)检测结果的阳性符合率为88.2%,阴性符合率为100%;并且与其他相关病毒基因无交叉反应,具有较好的特异性与灵敏性.其检测结果比EIA法检测庚肝病毒抗体更具临床意义.
关键词： 庚型肝炎病毒 逆转录-聚合酶链反应 荧光素标记基因探针 分子杂交
