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特异抗原性文献资料
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Bcr-abl融合基因片段的克隆及在原核细胞中的融合表达
目的:克隆和表达Bcr-abl融合基因融合位点周围的基因片段.方法:以慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株总RNA作为模板,采用RT-PCR方法扩增包含Bcr-abl(b3a2)融合位点周围的基因片段.将RT-PCR产物按正确的阅读框架,定向克隆进pGEX-6P-1载体谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的下游,将重组质粒转化大肠杆菌BL21菌株,以1.0 mmol/L IPTG诱导Bcr-abl融合基因片段的表达.结果:原核细胞融合表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,证实该融合蛋白为42000大小.用该表达产物免疫ICR小鼠,所制备的抗血清可与K562细胞特异性结合.结论:原核细胞表达的p42Bcr-abl融合蛋白具有p210Bcr-abl融合蛋白的特异抗原性,为进一步实验研究奠定了基础.
