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甘草抗肝窦内皮细胞缺氧损伤的活性成分筛选
目的:采用氯化钴(CoCl2)诱导肝窦内皮细胞SK-HEP-1缺氧模型,筛选甘草抗肝窦内皮细胞缺氧损伤的活性成分.方法:不同浓度CoCl2(12.5-1600 μM)与SK-HEP-1细胞孵育6h~72h,CCK8法与活性氧(ROS)检测评估CoCl2诱导SK-HEP-1细胞过氧化损伤.选择800μMCoCl2与SK-HEP-1细胞孵育24小时,同时加入不同浓度异甘草素、甘草苷、甘草素、甘草酸二铵盐、甘草酸、甘草酸单胺盐、甘草次酸(0~100μM),EdU掺入法检测细胞增殖,细胞免疫荧光染色检测一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS),荧光探针法检测活性氧含量.结果:与空白对照组相比,800μM CoCl2作用24h可以显著诱导细胞缺氧并促进SK-HEP-1细胞ROS含量、抑制SK-HEP-1细胞NO含量及NOS活性,并显著抑制SK-HEP-1细胞的增殖.异甘草素、甘草酸二铵盐可显著改善CoCl2诱导的SK-HEP-1细胞缺氧及其增殖抑制作用,显著抑制NO含量及NOS,抑制ROS含量.结论:CoCl2可诱导肝窦内皮细胞SK-HEP-1缺氧并显著抑制其增殖,甘草单体成分异甘草素、甘草酸二铵盐可以显著抑制CoCl2诱导的肝窦内皮细胞缺氧及其增殖抑制作用.