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沉默微小RNA-16通过激活核因子-κB通路介导肝癌细胞化疗耐药
目的 探讨沉默SMMC-7721中微小RNA(miRNA,miR)-16的表达对化疗耐药的影响及机制.方法 采用慢病毒载体构建稳定细胞株,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-16的表达及Western blot检测靶基因κB激酶抑制剂β(IKBKB)的表达确定构建结果.采用Western blot及噻唑蓝(MTT)比色法检测各细胞株对紫杉醇的敏感性及耐药机制.结果 7721-miR16组的miR-16表达量显著高于SMMC-7721组及7721-mock组(6.06 ±0.18比1.00±0.13比0.87±0.03,P=0.000).7721-shmiR组靶基因IKBKB蛋白表达量是7721-shmock组的25.73倍(P=0.000).7721-shmiR16细胞株中多药耐药蛋白1(MDRl)表达显著增加,对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)为4.903 μmol/L,是对照组(0.461μmol/L)的10.64倍(P=0.000).Western blot结果显示沉默miR-16主要通过激活细胞核因子-κB (NF-κB)通路导致MDR1表达增加.结论 沉默SMMC-7721中miR-16的表达,能显著增加IKBKB的表达,从而导致SMMC-7721细胞对紫杉醇耐药.