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长链非编码RNA NEAT1对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制
目的 探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)测定正常人胃黏膜上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株AGS、BSG823、Hs746T和MGC-803中lncRNA NEAT1的相对表达量.将AGS细胞株分为3组,下调表达组(si-NEAT1组)、阴性对照组(si-Ctrl组)及空白对照组(Blank组),细胞毒性活性检测(CCK-8)和克隆形成实验测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,蛋白印迹测定磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)及bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达.结果 lncRNA NEAT1在胃癌细胞株AGS、BSG823、Hs746T及MGC-803中表达量高于GES-1(P=0.000).在细胞培养72 h及96 h后,si-NEAT1组吸光度(A450nm)值低于si-Ctrl组和Blank组(P=0.001).si-NEAT1组克隆形成率低于si-Ctrl组[(31.43±3.25)％比(67.27±5.81)％,P=0.000].si-NEAT1组细胞凋亡率高于si-Ctrl组[(19.5±1.2)％比(3.7±0.3)％,P=0.000].si-NEAT1组p-Akt及bcl-2表达下调,bax表达上调.结论 lncRNA NEAT1在胃癌细胞株中高表达,lncRNANEAT1沉默表达抑制胃癌增殖并诱导凋亡,可能与p-Akt、bcl-2下调及bax上调有关.
关键词： 长链非编码RNA NEAT1 胃癌 增殖 凋亡 -
LncRNA NEAT1对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制
目的:观察长链非编码RNA NEAT1(long non-coding RNA NEAT1,lncRNA NEAT1)对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨其机制.方法:qRT-PCR用于测定正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,SMMC-7721及Huh7中lncRNA NEAT1表达水平.将HepG2细胞系分为NEAT1-siRNA组、Control-siRNA组和Mock组,NEAT1-siRNA组和Control-siRNA组经LipofectamineTM2000分别转染pcDNA3.1-lncRNA-NEAT1-shRNA及pcDNA3.1-lncRNA-NEAT1-NC,Mock组为阴性对照.CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验分别用于测定细胞增殖、迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western印迹分别测定miR-121和特异AT序列结合蛋白2(SATB2)的表达.结果:LncRNA NEAT1在肝癌细胞系HepG2,SMMC-7721及Huh7中的表达量高于正常肝细胞系L02(P＜0.05).CCK-8示:转染72及96 h后,NEAT1-siRNA组OD450nm值显著低于Control-siRNA组和Mock组(P＜0.05).NEAT1-siRNA组细胞划痕愈合率低于Control-siRNA组[(30.38+4.19)％ vs (54.78+5.83)％,P＜0.05].NEAT1-siRNA组侵袭细胞数少于Control-siRNA组[(107.5±8.1)个vs(178.1±13.4)个,P＜0.05].NEAT1-siRNA组miR-211相对表达量高于Control-siRNA组(P＜0.001).NEAT1-siRNA组SATB2相对表达量低于Control-siRNA组(P＜0.01).结论:LncRNA NEAT1在肝癌细胞系中高表达,沉默lncRNA NEAT1表达可抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与调控miR-211/SATB2信号途径有关.
关键词： 长链非编码RNA NEAT1 肝癌 增殖 迁移 侵袭
