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骨骼肌来源和骨骼肌筋膜来源的间充质干细胞成软骨差异的研究
目的 观察骨骼肌来源和骨骼肌筋膜来源的间充质干细胞成软骨能力的差异,以期找到合适的种子细胞达到抑制甚至逆转骨性关节炎软骨细胞退变.方法 取膝关节置换的患者的髌下骨骼肌组织及骨骼肌筋膜组织,酶消化法原代培养至第3代.波形蛋白(Vimentin)免疫荧光鉴定两种细胞,然后两种细胞进行三维立体培养(3D培养)来模拟体内细胞的生长环境并石蜡切片,阿尔新蓝(Alcian blue)染色研究两种细胞的成软骨能力差异.同时通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测成软骨及成骨标志物的基因表达量差异.结果 骨骼肌干细胞和骨骼肌筋膜干细胞爬片Vimentin免疫荧光结果,可以看到骨骼肌干细胞Vimentin免疫荧光的信号很弱,而骨骼肌筋膜干细胞的Vimentin免疫荧光呈阳性表现;两种细胞培养第14及第21天在3D培养条件下Alcian blue染色的情况是染色均有加深,但骨骼肌筋膜干细胞更加明显;骨骼肌筋膜干细胞的成软骨标志物性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)表达量明显高于骨骼肌干细胞.结论 骨骼肌筋膜来源间充质干细胞属于成纤维类细胞,而骨骼肌来源间充质干细胞属于成肌细胞.骨骼肌筋膜来源间充质干细胞成软骨能力较骨骼肌来源间充质干细胞更强,相反骨骼肌来源间充质干细胞的成骨能力更强.