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下调微小RNA-146b-5p通过增强自噬抑制人甲状腺乳头状癌细胞增殖
目的 探讨通过下调微小RNA(miRNA,miR)-146b-5p促进人甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1)自噬功能对其增殖功能的影响.方法 脂质体法瞬时转染,实验分为4组:as-miR组(miR-146b-5p inhibitor)、as-NC组、共转染组(as-miR-146b-5p+siBeclin1)和共转染对照组(as-miR-146b-5p+ siNC).倒置荧光显微镜和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染效率.Western blot和RT-qPCR检测转染后各组TPC-1细胞中Beclin1蛋白、mRNA的表达.透射电镜观察转染后各组TPC-1细胞中自噬小体的变化.细胞计数试剂盒(CCK-8)法和平板克隆形成实验检测转染后各组TPC-1细胞增殖能力变化.结果 与as-NC组比较,转染24h后as-miR组TPC-1细胞中miR-146b-5p表达下调为0.380 ±0.021,且Beclin1在蛋白和mRNA水平分别上调为0.612±0.014、0.413±0.005,电镜显示自噬小体明显增多,72 h的吸光度值下降为1.470±0.062 (P=0.007),单个细胞克隆形成率降低为(29.000 ±3.610)％ (P =0.031),差异均有统计学意义.与共转染对照组比较,转染36 h后共转染组TPC-1细胞中Beclin1在蛋白和mRNA水平分别下调为0.286±0.027、0.265±0.025,电镜显示自噬小体明显减少,72 h的吸光度值上升为2.564±0.050(P =0.006),单个细胞克隆形成率升高为(49.000 ±2.821)％(P =0.027).结论 下调miR-146b-5p通过增强自噬抑制TPC-1细胞的增殖能力.
关键词： 微小RNA-146b-5p 甲状腺乳头状癌 自噬 Beclin1 -
微小RNA-146b-5p对甲状腺乳头状癌细胞生物学特性的影响
目的 通过慢病毒实验观察miR-146b-5p过表达对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、凋亡及周期的生物学特性的影响.方法 将慢病毒质粒LV3-绿色荧光蛋白(GFP)-miR-146b-5p稳定转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞株中,通过应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞仪技术检测miR-146b-5p对于甲状腺乳头状癌细胞生物学特性的影响.结果 转染miR-146b-5p基因组TPC-1细胞增殖能力升高为(134.80±0.56)％、凋亡率明显降低为(3.13±0.34)％、转染miR-146b-5p的TPC-1细胞G2～M期进程受到抑制,细胞停留在S期的比例增加,G2期比例增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-146b-5p与甲状腺乳头状癌的发生发展相关.
关键词： 微小RNA-146b-5p 甲状腺乳头状癌 脱噬作用
