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瞬时感受器电位香草酸受体3离子通道蛋白在膀胱癌细胞中的表达及其对细胞增殖迁移能力的影响
目的 观察瞬时感受器电位香草酸受体3离子通道蛋白(TRPV3)表达对体外膀胱癌细胞株SW780的增殖凋亡和生物学功能的影响.方法 应用基因转染方法观察TRPV3基因表达对体外膀胱癌细胞SW780的抗增殖作用和生物学功能的影响;通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TRPV3 mRNA在SW780细胞中的表达水平,Real-time PCR测定转染后SW780细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK) mRNA水平表达变化,并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、苏木素-伊红(HE)染色、显微镜等观察比较转染TRPV3基因的SW780细胞的迁移能力、增殖凋亡和形态学改变.结果 Real-time PCR和免疫组织化学结果证实转染后SW780细胞中有TRPV3稳定表达;Real-time PCR结果显示:A组Ras、Raf和Akt mRNA吸光度值分别为0.87±0.17、0.46±0.11和0.92±0.25,B组分别为1.71 ±0.32、1.63±0.29和1.95 ±0.38,C组分别为1.59±0.30、1.51±0.25和1.80 ±0.31.转染后SW780细胞中Ras、Raf和Akt mRNA水平显著降低(P＜0.01).MTT法结果显示,SW780细胞A组(10∶1)24 h和48 h的抑制率分别为(19.58±2.83)％和(46.23 ±3.99)％,A组(20∶1)分别为(44.64 ±5.27)％和(68.73±7.51)％,A组(40∶1)分别为(59.63±6.85)％和(79.52±7.93)％.B、C组SW780细胞在24 h和48 h时无明显凋亡.表明随着TRPV3与SW780细胞效靶比增加及作用时间延长,抑制率明显增强(P＜0.01).划痕实验结果显示:TRPV3转染的SW780细胞迁移能力低于正常SW780细胞.TRPV3作用于膀胱癌细胞24h后,形态学观察膀胱癌细胞发生凋亡或坏死.结论 TRPV3基因转染对体外膀胱癌细胞SW780细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用.
关键词： 膀胱癌 瞬时感受器电位香草酸受体3离子通道 脱噬作用 生物学功能
