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门控基因文献资料
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siRNA抑制肝癌细胞DNA修复门控基因表达的实验
目的 本实验旨在研究siRNA抑制DNA修复门控基因Rad52、Ku70和Ku80的效果并筛选出高效的siRNA作用靶位.方法 依据siRNA设计原则,针对每一个门控基因的mRNA序列各选择了2个靶位点并构建了相应的siRNA表达载体(psiRNA1～6).酶切分析及DNA测序鉴定重组质粒构建成功后,将其转染人肝癌细胞株HepG2.RT-PCR和Western Blot分别用来检测psiRNAs在转录水平和翻译水平干扰靶基因的效果.结果 psiRNA1～6作用细胞后明显抑制了靶基因的表达.比较而言,psiRNA1、psiRNA4、psiRNA5干扰效果分别比psiRNA2、psiRNA3、psiRNA6更佳.结论 siRNA为进一步研究DNA修复门控基因Rad52、Ku70和Ku80的功能奠定基础.
