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Cyclopamine对神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞生长周期的影响及其机制
目的 探讨Shh信号途径的抑制剂cyclopamine对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞生长周期的影响及其分子生物学机制.方法 以不同浓度的cyclopamine处理SK-N-SH细胞不同时间,在相差倒置显微镜下观察药物作用后的该细胞形态学变化.用四甲基偶氮唑盐(MTT)分析法检测各组SK-N-SH细胞的增殖情况,流式细胞仪检测不同浓度cyclopamine作用后对细胞周期的影响,Western blot检测药物作用前后细胞周期蛋白D1、P16和P21蛋白表达的变化.结果 cyclopamine各处理组SK-N-SH细胞形态学有所不同.MTT法检测结果显示,cyclopamine对SK-N-SH细胞增殖的抑制是浓度依赖性和时间依赖性的(P<0.05).流式细胞仪检测发现随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞百分比明显增加(P<0.05),而S期细胞百分比明显降低(P<0.05).Western blot检测结果显示,随着药物浓度的增加,SK-N-SH细胞中细胞周期蛋白Dl表达逐渐降低,P16和P21表达逐渐增高(P<0.05).结论 cyclopamine抑制SK-N-SH细胞生长,阻滞细胞从G1期向S期转化,其机制可能与调控细胞周期蛋白表达有关.cyclopamine可能成为未来治疗神经母细胞瘤的药物之一.
