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MCF-12A文献资料
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GPER抑制剂对雌激素长期诱导的MCF-12A乳腺上皮细胞生长和克隆形成的影响
目的:研究GPER(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)抑制剂对雌激素(estrogen,E2)长期作用下乳腺上皮细胞生长和克隆形成的影响,探讨阻断GPER受体防治乳腺癌的可能性.方法:分别使用E2、E2+ G15和G15持续作用MCF-12A细胞5周(共传11代)建立细胞模型,通过光镜观察细胞形态的变化、台盼蓝计数法分析细胞生长变化,采用Western blot检测雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)及GPER蛋白表达变化,软琼脂糖克隆形成实验分析细胞克隆形成能力.结果:(1)MCF-12A经E2(10,20和40 nmol·L-1)连续处理5周后,其体外生长能力与E2浓度呈一定剂量依赖性,其中,E2(20 nmol·L-1)组细胞呈多层重叠样生长,排列紊乱,形态变化为显著.(2)相比于对照组,E2组中不同代数细胞的ERα蛋白表达明显下调,且呈一定时间依赖性,而GPER蛋白表达未见明显变化.(3) GPER抑制剂G15能抑制E2诱导的细胞生长.(4)G15抑制E2诱导的细胞克隆形成.结论:G15可抑制E2对乳腺上皮细胞MCF-12A的促生长及克隆形成作用,提示GPER抑制剂可能可作为乳腺癌的防治药物.
关键词： 17β-雌二醇 G蛋白偶联雌激素受体 MCF-12A 细胞生长 克隆形成
