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褪黑素对鞘内泵人吗啡致免疫功能抑制大鼠免疫功能的影响
目的 本实验采用ALZET泵建立鞘内持续泵入吗啡所致的免疫功能抑制大鼠模型,腹腔注射褪黑素观察其对鞘内泵入吗啡大鼠免疫功能的影响.方法 32只SD大鼠随机分为4组:生理盐水组(NS组,n=8)、吗啡组(M组,10μg/h,n=8),吗啡组+褪黑素组(M+MLT组,n=8),吗啡组+生理盐水组(M+NS组,n=8).用microspinal导管根据改良Yaksh法进行鞘内置管,连接ALZET泵,持续泵入吗啡、生理盐水,MLT组连续7 d腹腔注射褪黑素,每次时间点为7:00-9:00am,5 mg/kg.M+NS组连续7 d腹腔注射生理盐水.7 d后原代分离脾脏单个核细胞进行培养,采用3H-TDR(甲基3H胸腺嘧啶核苷)掺入法检测脾T淋巴细胞对刀豆蛋白(ConA)刺激诱导的增殖水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾NK细胞活性;流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+)和NK细胞(CD161+)表型变化.结果 与NS组相比较,泵入吗啡7 d后M组T淋巴细胞增殖水平、NK细胞活性降低(P＜0.05),M组CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞数量及百分率降低,CD4+/CD8+降低,CD161+降低(P＜0.05);同M+NS组比较,M+MLT组T淋巴细胞增殖水平、NK细胞活性升高(P＜0.05),M+MLT组CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+数量及百分率升高,CD4+/CD8+升高,CD161+升高(P＜0.05).结论 鞘内泵入吗啡(10μg/h)可明显抑制大鼠细胞免疫功能;褪黑素可改善鞘内泵入吗啡所致的免疫功能抑制大鼠细胞免疫功能.
