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SSUrRNA文献资料
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荧光定量PCR技术在疟疾诊断中的应用
疟疾是一种严重危害人类健康和生命的疾病,我国输入性疟疾呈上升趋势,近年来国内外应用荧光定量PCR技术进行疟疾的快速检测和分型,在低密度疟原虫感染水平的检测更为敏感.荧光探针法是利用探针与靶序列特异杂交来指示扩增产物的增加,特异性高,但试剂价格昂贵,而且对样本处理有特殊要求.荧光染料法是利用它结合到双链DNA发射荧光信号指示扩增产物的增加,简便易行,相对便宜,但是不能用于多重检测.随着荧光定量PCR技术的不断发展,在标本处理、标记技术等领域有了新的进展,并在疟原虫耐药性监测方面有广泛应用.
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间日疟原虫海南株SSUrRNA编码基因的克隆及其序列分析
目的 克隆间日疟原虫海南株红内期小亚基核糖体核糖核酸(SSUrRNA)编码基因片段,并进行序列特征分析.方法 采用聚合酶链反应技术从海南间日疟患者血样DNA中扩增出间日疟原虫SSUrRNA基因片段,纯化后与pGEM-Teasy质粒连接构建重组子并转化大肠杆菌JM109;阳性克隆以双酶切和PCR鉴定后,进行序列测定,采用BLAST软件分析其特征.结果 PCR扩增出间日疟原虫红内期SSUrRNA基因特异性片段大小约为998 bp;阳性克隆重组质粒经双酶切及PCR鉴定与预期结果一致;核酸序列测定显示插入的SSUrRNA基因扩增片段,含有998个核苷酸,与GenBank中的间日疟原虫Sal 1株、Pv2008/TR/DEL株及El Salvador株相同序列进行比对,其同源性均大于99%.结论成功克隆问日疟原虫海南株红内期SSUrRNA编码基因序列,该序列在不同地理株间相对稳定保守.
