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哮喘小鼠VEGF和抑瘤素M的表达及布地奈德的干预作用
【目的】探讨哮喘小鼠气道和肺组织中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及抑瘤素 M(oncostatin M,OSM)的表达及布地奈德的干预作用。【方法】45只健康6~8周龄雌性清洁级 BALB/C 小鼠随机分为：哮喘模型组(A 组)、布地奈德干预组(B 组)和空白对照组(C 组),每组15只。观察各组小鼠气道及肺组织的病理变化,免疫组化及 RT-PCR 检测 VEGF 及 OSM 的蛋白和 mRNA 表达。【结果】VEGF 和 OSM 的蛋白及 mRNA 在 A 组的表达显著高于 B 组和 C 组,且差异有显著性(P <0.05),A组 OSM 蛋白和 VEGF 蛋白的表达呈正相关(r =0.41,P <0.05)。【结论】①VEGF 和 OSM 在哮喘小鼠的气道和肺组织中表达增高,布地奈德干预可使其表达降低。②VEGF 和 OSM 参与哮喘的气道重塑过程,两者呈直线相关。③布地奈德干预可以通过减少 VEGF 和 OSM 的表达影响哮喘气道重塑。
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抗前列腺癌多肽的可溶性表达及纯化
目的:探讨抗前列腺癌多肽的可溶性融合蛋白的表达条件,并获得其纯化蛋白,为后续的体内、外活性实验奠定基础.方法:采用Phamacia公司商品化的GST融合表达载体pGEX-4T-2,向细菌培养基中加入IPTG后,诱导Ptac启动子下游的外源目的基因表达.通过对不同培养基、不同温度、不同诱导时间及不同诱导剂浓度下可溶性目的蛋白的表达量进行探索,筛选出表达量高的组合方式,并通过GST亲合层析柱GSTrap FF对获得的可溶性蛋白进行纯化.结果:成功进行了GST-APP216融合蛋白的可溶性表达,在IPTG浓度为0.2 mmol/L,27℃条件下,诱导表达4.5h时表达量高.经凝胶成像系统进行密度扫描显示,该可溶性蛋白的表达量约占上清总蛋白量的36.2%.并获得了纯化的APP216蛋白,经紫外分光光度计测定标准品,绘制标准曲线.测定260/280nm处吸光度的比值,得到纯化蛋白的浓度为323.1μg/ml.结论:APP216纯化蛋白的获得,为进一步检测抗前列腺癌多肽体外、体内的肿瘤杀伤作用奠定了坚实的实验基础.
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组织多肽特异性抗原水平检测对良恶性胸水的诊断价值
目的:探讨血清及胸水中组织多肽特异性抗原(TPS)对良恶性胸水的诊断价值.方法: 用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定了32例肺癌患者(肺癌组)和30例结核性胸膜炎患者(对照组)血清及胸水中TPS的水平.结果:肺癌组血清中TPS水平为271.37±94.96U/L,显著高于良性对照组(145.06±77.02U/L).肺癌组胸水中TPS水平为406.85±103.43U/L,显著高于良性对照组(206.50±157.37U/L).非小细胞癌(NSCLC)血清TPS水平为302.49±76.09 U/L,显著高于小细胞癌(SCLG)组(157.24±66.92 U/L);鳞癌血清TPS水平为338.13±82.70 U/L,显著高于腺癌组(272.80±57.81U/L).NSCLC的胸水TPS水平为469.56±81.76U/L,显著高于SCLC组(273.65±123.36 U/L),两组比较有极显著性差异(P＜0.01).虽然鳞癌胸水TPS水平(469.56±81.76 U/L)高于腺癌胸水TPS水平(441.13±54.46U/L),但无显著性差异(P＞0.05).结论: TPS水平检测对良恶性胸水的鉴别诊断具有重要价值,同时也是鉴别小细胞肺癌和非小细胞肺癌的较好指标之一.
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先天性巨结肠症患儿结肠组织PPTAmRNA表达的研究
目的:探讨SP前体前速激肽原mRNA(PPTAmRNA)与先天性巨结肠的关系,进一步阐明先天性巨结肠的神经病理机制.方法:应用原位杂交组织化学的方法分别观察了PPTAmRNA在先天性巨结肠患儿结肠扩张段、移行段、狭窄段及“正常”对照患儿结肠组织的表达.结果:无神经节细胞的巨结肠狭窄段PPTAmRNA无表达,扩张段与“正常”对照PPTAmRNA表达无明显差异,移行段PPTAmRNA表达较扩张段与“正常”对照减少.结论:PPTAmRNA可能参与了先天性巨结肠症的发病机制,先天性巨结肠症与结肠肌间神经丛和黏膜下神经丛肽能神经缺乏有关.
