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缝隙连接蛋白43基因文献资料
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慢病毒载体介导人缝隙连接蛋白43基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
目的 构建带有缝隙连接蛋白43基因的慢病毒载体,并实现该基因在大鼠骨髓间质干细胞中的表达.方法 通过逆转录聚合酶链反应获得人缝隙连接蛋白43基因,利用infusion技术重组构建慢病毒载体质粒FUGW-缝隙连接蛋白43, 在脂质体介导下与包装质粒和包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒.所获慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后,在荧光显微镜下观察缝隙连接蛋白43蛋白表达情况.结果 所获缝隙连接蛋白43基因经测序后与GeneBank报道序列完全一致;重组慢病毒载体质粒FUGW-缝隙连接蛋白43经鉴定正确;三质粒共转染293T 细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为1×1011TU/L;感染大鼠骨髓间充质干细胞后荧光显微镜观察到胞膜位置点线状荧光分布.结论 成功构建带有缝隙连接蛋白43基因的慢病毒载体并实现在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达,为间充质干细胞移植治疗心肌梗死的应用奠定了基础.
关键词： 内科学 慢病毒载体 缝隙连接蛋白43基因 绿色荧光蛋白 骨髓间充质干细胞
